描述：體外實(shí)驗(yàn)的初始階段，絕大多數(shù)真核生物 mRNA 5' 端 m7G 帽結(jié)構(gòu)可促進(jìn)翻譯。對于絕大多數(shù) RNA，帽結(jié)構(gòu)都可提高 RNA 的穩(wěn)定性，降低其對核酸外切酶降解的敏感性，并促進(jìn) mRNA 起始復(fù)合體的形成。一些具有 5' 端帽結(jié)構(gòu)的原核 mRNA 也可以像真核 mRNA 一樣，能在真核生物無細(xì)胞蛋白合成體系中獲得高效翻譯。另外，還發(fā)現(xiàn)在真核生物靶 RNA 的剪切過程同樣需要帽結(jié)構(gòu)。
*也被稱為 Anti-reverse Cap Analog （ARCA） ，即抗-反向帽類似物。
體外實(shí)驗(yàn)的初始階段，絕大多數(shù)真核生物 mRNA 5' 端 m7G 帽結(jié)構(gòu)可促進(jìn)翻譯。對于絕大多數(shù) RNA，帽結(jié)構(gòu)都可提高 RNA 的穩(wěn)定性，降低其對核酸外切酶降解的敏感性，并促進(jìn) mRNA 起始復(fù)合體的形成。一些具有 5' 端帽結(jié)構(gòu)的原核 mRNA 也可以像真核 mRNA 一樣，能在真核生物無細(xì)胞蛋白合成體系中獲得高效翻譯。另外，還發(fā)現(xiàn)在真核生物靶 RNA 的剪切過程同樣需要帽結(jié)構(gòu)。
用 7 甲基 G 帽結(jié)構(gòu)類似物，m7G（5' ）ppp（5' ）G （NEB#S1404） 作為引物能在 SP6 RNA 聚合酶、T7 RNA 聚合酶和 T3 RNA 聚合酶作用下，轉(zhuǎn)錄出更多的帶帽RNA。因?yàn)檗D(zhuǎn)錄時(shí)，T7 RNA 聚合酶摻入的*個(gè)堿基是 G，所以用 #S1405 或 #S1406 轉(zhuǎn)錄出帶有 A-帽結(jié)構(gòu)的 RNA，就不能夠翻譯，但這對于轉(zhuǎn)染和顯微注射實(shí)驗(yàn)有很好的穩(wěn)定性。Contrease 等已經(jīng)建立了一套方法，以 m7G（5' ）ppp（5' ）G （NEB #S1404）或 m7G（5' ）ppp（5' ）A （NEB #S1405） 為引物，利用 E. coli RNA 聚合酶，在體外有效合成帶帽 RNA。
帽類似物有兩個(gè)3' 羥基基團(tuán)使得它們可從任一方向結(jié)合到 RNA 上。而抗-反向帽類似物（ARCA）3' OMethyl-m7G（5' ）ppp（5' ）G （NEB #S1411） 的一個(gè)羥基被甲基化，只能以 m7G 作為*個(gè)堿基與 RNA 結(jié)合，而這個(gè)方向可以增強(qiáng)體外翻譯。
N-7003
ARCA （Anti Reverse Cap Analog）
key step in cellular mRNA processing is the addition of a 5’ cap structure, which is a 5'-5' triphosphate linkage between the 5' end of the RNA and a guanosine nucleotide. The cap is methylated enzymatically at the N-7 position of the guanosine to form mature mCAP.
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| N-7003-1 | ARCA | 1umole |
| N-7003-10 | ARCA | 10umoles |
| N-7003-5 | ARCA | 5umoles |
